HE染色石蜡切片制作的基本过程
作者：未知 来源：生物秀 时间：2007-12-7
1、取材与固定：
从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
2、脱水透明：
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
3、浸蜡包埋：
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
4、切片与贴片：
将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。
5、脱蜡染色：
常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色。
HE染色过程是：
①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。
②酸水及氨水中分色，各数秒钟。
③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。
④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。
⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
6、脱水透明：
染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
7、封固：
将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用。
.甲苯胺蓝液染色方法: (一)1.甲苯胺蓝液 甲苯胺蓝0.5g 蒸馏水定容至100ml 2.冰醋酸液 冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml 染色步骤 1.组织切片常规脱蜡至水 2.入甲苯胺蓝液30min 3.稍水洗 4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。 5.稍水洗，用冷风吹干 6.二甲苯透明，中性树胶封固 (二) ①切片脱腊至水。 ②蒸馏水浸洗3次。 ③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。 ④水洗，洗去多余染液。 ⑤各级酒精脱水。 ⑥二甲苯透明，中性树胶封固。①石蜡切片常规脱蜡至水；②滴加1%甲苯胺蓝液染色5min～8min(染液配制：1g甲苯胺蓝溶于100ml蒸馏水，滴加媒染剂2ml，置于60℃温箱2h，然后移 置室温备用)；③蒸馏水洗；④95%乙醇急速分化；⑤无水乙醇脱水，二甲苯透明中性树胶封固.